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信号通路
英文名称: Human Calreticulin (CRT) ELISA Kit
别名: CRT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
钙网蛋白(Calreticulin),简称CRT,也被称为calregulin、CRP55、CaBP3、calsequestrin-like protein和内质网驻留蛋白60(ERp60),由CALR基因编码的蛋白质。Calreticulin是一种多功能的可溶性蛋白,它与Ca2+离子结合,使其失去活性。Ca2+结合的亲和力低,但容量大,可以在有信号时释放。钙调蛋白位于与内质网相关的储存室中,被认为是一种ER常驻蛋白。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人钙网蛋白(CRT)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人钙网蛋白(CRT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CRT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.36
1.36
0.8
0.48
0.34
0.28
0.23
0.09
校正OD 值
2.27
1.27
0.71
0.39
0.19
0.19
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CRT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.9
96.70
血浆(n=8)
92.9-105.3
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.2
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人CRT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.8
91.60
88.1-96.7
93.80
90.7-110.4
96.40
1:04
范围
平均回收率
88.2-103.2
94.40
87.1-108.5
98.30
105.3-115.9
108.70
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