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信号通路
英文名称: Human Calprotectin (CALP) ELISA Kit
别名: CALP
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.8ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
钙卫蛋白(CALP)是中性粒细胞产生的钙结合蛋白(约36 kDa),占细胞总蛋白质的5%。具有组织或细胞特异性,可作为急性炎性细胞活化的标志物。它由两条分子量为14 kD的重链和一条分子量为8 kD的轻链以共价键连接的钙结合蛋白质异三聚体组成,具有耐热性和增强水解性的特性。1980年由Fagerhol等首先从中性粒细胞中分离出来,命名为L1蛋白质。Dorin和Freemont等进一步证实这种蛋白质具有S-100 蛋白的结构特征,后来将此种具有保护性、多功能、与钙结合的蛋白质命名为钙卫蛋白。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人钙卫蛋白(CALP)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人钙卫蛋白(CALP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CALP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CALP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.5
96.80
血浆(n=8)
92.1-105.6
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.4
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人CALP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.5
91.10
88.5-96.1
93.20
90.6-110.1
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.0
94.60
87.4-108.9
98.30
105.3-114.6
108.50
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