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信号通路
英文名称: Human Metallothionein 1 (MT-1) ELISA Kit
别名: MT-1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.11ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
金属硫蛋白是一个富含半胱氨酸、低分子量(MW从500到14000Da)的蛋白质家族。它们定位在高尔基体的膜上。MTs有能力通过其半胱氨酸残基的硫醇基团结合生理性(如锌、铜、硒)和异生物(如镉、汞、银、砷)重金属,这占其组成氨基酸残基的近30%。在人类中主要有四种异构体表达:MT1(亚型A、B、E、F、G、H、L、M、X),MT2,MT3,和MT4。在人体内,主要在肝脏和肾脏中大量合成。它们的产生取决于膳食中的矿物质,如锌、铜和硒,以及氨基酸组氨酸和半胱氨酸的可用性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人金属硫蛋白1(MT-1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人金属硫蛋白1(MT-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MT-1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.6
1.9
1.24
0.75
0.46
0.31
0.22
0.07
校正OD 值
2.51
1.81
1.15
0.66
0.22
0.22
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人MT-1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.3
96.40
血浆(n=8)
92.1-105.2
102.90
组织匀浆(n=8)
96.7-108.7
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人MT-1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.9
91.10
88.0-97.2
93.10
90.4-110.3
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.3
94.60
87.6-108.9
98.30
105.4-115.7
108.10
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