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信号通路
英文名称: Human Long-chain-fatty-acid—CoA ligase 4 (ACSL4) ELISA KIT
别名: ACSL4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.073ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
酰基辅酶 A 合成酶长链家族成员 4,也被称为 ACSL4,是由 ACSL4 基因编 码的酶。该基因编码的蛋白质是长链脂肪酸-辅酶 A 连接酶家族的同工酶。 尽管底物特异性、亚细胞定位和组织分布不同,但该家族的所有同工酶都将 游离的长链脂肪酸转化为脂肪酰基-CoA 酯,从而在脂质生物合成和脂肪酸 降解中发挥关键作用。这种同工酶优先利用花生四烯酸作为底物。这种酶的 缺乏可能导致 智力低下或 Alport 综合征。该基因的可变剪接产生 2 个转录 变体。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ACSL4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人ACSL4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.2-105.9
102.10
细胞裂解液(n=8)
96.7-108.2
105.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人ACSL4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.5-96.6
92.90
90.4-110.7
93.50
1:04
范围
平均回收率
87.5-106.7
98.40
105.9-115.0
111.70
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