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信号通路
英文名称: Human zonulin ELISA Kit
别名: zonulin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.072ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
连蛋白(zonulin)是一种调节消化道壁细胞之间紧密连接的渗透性的蛋白质。它是由马里兰大学医学院的Alessio Fasano和他的团队于2000年发现。作为霍乱病原体霍乱弧菌分泌的Zonula occludens毒素的哺乳动物类似物,它被认为与腹腔疾病和1型糖尿病的发病机制有关。Gliadin(存在于小麦中的糖蛋白)激活了zonulin信号,与自身免疫的遗传表达无关,导致肠道对大分子物质的通透性增加。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人连蛋白(zonulin)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人连蛋白(zonulin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的zonulin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.15
1.7
1.2
0.77
0.43
0.23
0.14
0.04
校正OD 值
2.06
1.61
1.11
0.68
0.14
0.14
0.05
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人zonulin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.2
96.10
血浆(n=8)
92.6-104.7
101.50
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.7
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人zonulin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.2-96.3
92.40
88.0-96.4
93.30
90.7-110.3
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.4
94.90
87.7-108.7
98.60
105.3-115.7
108.90
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