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信号通路
英文名称: Human Transcription factor Sp1 (Sp1) ELISA Kit
别名: Sp1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.08ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
特异性蛋白1(Sp1),也被称为转录因子Sp1,是由Sp1基因编码的蛋白质,是属于Sp/KLF家族的转录因子。该基因编码的蛋白质是锌指转录因子,与许多启动子的富含GC的基序结合。编码的蛋白质参与许多细胞过程,包括细胞分化、细胞生长、细胞凋亡、免疫反应,对DNA损伤的反应和染色质重塑。翻译后修饰,如磷酸化、乙酰化、O-GlcNAcylation和蛋白水解处理,会显著影响这种蛋白质的活性,这种蛋白质可以是激活剂,也可以是抑制剂。在SV40病毒中,它与基因组调节区(RR)中的GC盒结合。该蛋白质长785个氨基酸,分子量为81kDa。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人转录因子Sp1(Sp1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人转录因子Sp1(Sp1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的Sp1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.23
1.31
0.9
0.62
0.43
0.32
0.26
0.1
校正OD 值
2.14
1.22
0.81
0.53
0.23
0.23
0.17
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人Sp1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
81.4-101.6
96.30
细胞培养上清(n=8)
92.4-105.3
103.70
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人Sp1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.9-95.7
91.20
88.4-96.5
90.80
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.1
94.40
87.9-108.6
98.40
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