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信号通路
英文名称: Human Podocin (PDCN) ELISA Kit
别名: PDCN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.36ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、尿液、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
足突蛋白(Podocin)是荚膜细胞的过滤缝隙的蛋白质成分。肾小球毛细血管内皮细胞、肾小球基底膜和滤过缝作为肾小球的过滤屏障。Podocin基因NPHS2的突变可引起肾病综合征,如局灶性节段性肾小球硬化症(FSGS)或最小变化病(MCD)。Podocin是一个由383个氨基酸组成的Band-7-stomatin家族的膜蛋白。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人足突蛋白(PDCN)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人足突蛋白(PDCN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PDCN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.18
1.57
1.03
0.62
0.42
0.32
0.26
0.1
校正OD 值
2.09
1.48
0.94
0.53
0.23
0.23
0.17
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人细胞裂解液组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PDCN , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
细胞裂解液(n=8)
84.0-101.5
96.50
组织匀浆(n=8)
92.9-105.4
102.10
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.0
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人细胞裂解液组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人PDCN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
细胞裂解液
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.1
90.30
88.1-96.1
93.90
90.8-110.9
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.1
94.10
87.8-108.1
98.60
105.9-115.9
108.20
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