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信号通路
英文名称: Human Heat Shock Protein 60 (Hsp60) ELISA Kit
别名: HSP-60
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.68ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
超敏热休克蛋白60(HSP60)也被称为伴侣蛋白(Cpn),是一个热休克蛋白家族,最初以其60kDa的分子质量进行分类。它们通过协助蛋白质折叠,防止蛋白质在高热等应激情况下发生错误折叠。它属于一大类协助蛋白质折叠的分子,被称为分子伴侣。这些伴侣蛋白的结构类似于两个甜甜圈,相互堆叠在一起形成一个桶状。每个环由7、8或9个亚单位组成,这取决于发现伴侣蛋白的生物体。每条~60kDa的肽链可以分为三个域,顶端、中间和赤道。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人热休克蛋白60(HSP-60)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人热休克蛋白60(HSP-60)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的HSP-60, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.29
1.64
1.08
0.7
0.44
0.28
0.19
0.08
校正OD 值
2.2
1.55
0.99
0.61
0.19
0.19
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人HSP-60 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
82.7-101.9
94.70
血浆(n=8)
92.1-105.0
101.70
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.9
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人HSP-60 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.4
91.50
88.3-96.1
93.50
90.0-110.6
96.90
1:04
范围
平均回收率
88.9-103.5
93.80
87.3-108.0
98.20
105.0-115.7
108.70
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