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信号通路
英文名称: Human Keratin 5 (KRT5) ELISA Kit
别名: KRT5
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 7.9pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
角蛋白 5,也被称为 KRT5,K5,是由 KRT5 基因编码的蛋白质。它与角蛋 白 14 二聚化,形成构成基底上皮细胞细胞骨架的中间丝(IF)。这种蛋白质 参与多种疾病,包括单纯性大疱性表皮松解症和乳腺癌和肺癌。角蛋白 5(和 K14)主要在表皮的基底角质形成细胞中表达,特别是在皮肤和消化道衬里 的分层上皮中。角蛋白中间丝构成了上皮细胞内的细胞骨架支架,这有助于 细胞结构,并为细胞提供承受机械和非机械应力的能力。K5/K14 角蛋白对 能够进行广泛的捆绑,因为 K15 的非螺旋尾部在中间细丝表面起着弱交联剂 的作用。这种捆绑增加了中间细丝的弹性,从而增加了机械弹性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人角蛋白5(KRT5)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人角蛋白5(KRT5)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的KRT5, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人KRT5 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.2
95.10
血浆(n=8)
92.5-105.3
102.20
细胞培养上清(n=8)
98.8-108.3
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人KRT5 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.1
91.20
88.6-96.4
92.90
90.9-110.2
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.9
94.60
87.1-108.2
98.80
104.0-115.1
108.20
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