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信号通路
英文名称: Human Complement protein 4 (C4) ELISA Kit
别名: C4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.51ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
补体蛋白4(C4)是一种参与错综复杂的补体系统的蛋白质,源于人类白细胞 抗原(HLA)系统。它在免疫、耐受和自身免疫中与其他众多成分一起发挥 着一些关键功能。此外,它是连接由抗体-抗原(Ab-Ag)复合物煽动的整 个系统的识别途径和先天免疫反应的其他效应蛋白的一个关键因素。C4 (C4A 和 C4B 的混合物) 参与所有三种补体途径 (经典、替代和凝集素);替代途径是“自发触发”的,而经典途径和凝集素途径是在识别特定微生物时触发的。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人补体蛋白4(C4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人补体蛋白4(C4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的C4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.51
1.58
0.94
0.61
0.38
0.26
0.23
0.08
校正OD 值
2.42
1.49
0.85
0.52
0.17
0.17
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人C4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
81.2-103.1
92.90
血浆(n=8)
87.7-111.4
102.10
细胞培养上清(n=8)
94.2-111.0
101.70
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人C4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
86.3-109.5
102.70
85.2-115.2
101.30
100.4-110.9
106.90
1:04
范围
平均回收率
94.1-114.8
102.60
89.0-110.9
103.90
87.4-105.1
97.80
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