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信号通路
英文名称: Human Complement Complex C5b (c5b) ELISA KIT
别名: C5b
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.76ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
补体成分 5 是补体的第五种成分,在炎症和细胞杀伤过程中发挥着重要作用。这种蛋白质由通过二硫桥连接的α和β多肽链组成。C5a 是一种活化肽,它是一种具有强大致痉和趋化活性的无性毒素,通过 C5 转化酶从α 多肽裂解而来。 C5b 大分子裂解产物可与 C6 补体成分形成复合物,这种复合物是形成膜攻击复合物的基础,膜攻击复合物包括其他补体成分。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人补体片段5b(C5b)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人补体片段5b(C5b)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的C5b, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人C5b , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.6
96.10
血浆(n=8)
92.5-105.8
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.7-107.2
104.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人C5b , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-96.3
92.90
88.5-95.8
93.10
90.6-110.6
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.2
94.50
87.5-108.0
98.40
105.0-115.8
108.50
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