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信号通路
英文名称: Human Complement Component 3a (C3a) ELISA Kit
别名: C3a
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.053ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
补体片断3a(C3a)是由补体成分3裂解形成的蛋白质之一;另一个是C3b。C3a是一种有77个残基的无源性毒素,与C3a受体(C3aR)结合,是一种A类G蛋白偶联受体。它在免疫反应中起着很大的作用。C3a分子通过GPCR C3a受体诱导反应。与其他无精蛋白一样,C3a通过裂解其羧基末端的精氨酸来调节,从而产生一个具有较低炎症功能的分子(C3a去精氨酸)。它是补体系统的效应物,具有一系列功能,包括T细胞的激活和存活,刺激血管生成,趋化作用,肥大细胞脱颗粒和巨噬细胞激活。它已被证明具有促炎症和抗炎症反应,其活性能够抵消C5a的促炎症作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人补体片断3a(C3a)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人补体片断3a(C3a)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的C3a, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.36
1.7
1.26
0.87
0.6
0.4
0.28
0.09
校正OD 值
2.27
1.61
1.17
0.78
0.31
0.31
0.19
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人C3a , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.4
96.10
血浆(n=8)
92.0-105.9
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.8
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人C3a , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.6
91.70
88.0-96.7
93.30
90.8-110.9
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.5
94.60
87.1-108.7
98.40
105.4-115.7
108.10
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