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信号通路
英文名称: Human Complement Factor I (CFI) ELISA Kit
别名: CFI
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.074ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
补体因子 I,又称 C3b/C4b 灭活剂,由 CFI 基因编码的蛋白质。通过裂解细胞结合或液相 C3b 和 C4b 来调节补体的激活。它是一种可溶性糖蛋白,在人体血液中循环的平均浓度为 35 微克/毫升。因子 I 主要在肝脏中合成,也在单核细胞、成纤维细胞、角质细胞和内皮细胞中合成。合成后,它是一条66kDa 的多肽链,在 6 个位置有 N-连接的糖。然后,因子 I 被呋喃酶裂解, 产生成熟的因子 I 蛋白,它是重链(残基 19-335,51kDalton)和轻链(残基 340-583,37kDalton)的二硫键连接的二聚体。只有成熟蛋白才有活性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人补体因子I(CFI)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人补体因子I(CFI)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CFI, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的人CFI , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.7
96.50
血浆(n=8)
92.7-105.0
102.10
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆中加入高浓度人CFI , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.8
91.30
88.9-96.9
93.70
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.2
94.30
87.0-108.5
98.10
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