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信号通路
英文名称: Human Complement Factor D (CFD) ELISA Kit
别名: CFD
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.19ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
补体因子D(CFD)是一种蛋白质，由CFD基因编码。该基因所编码的蛋白是由脂肪细胞分泌到血液中的丝氨酸蛋白酶家族的成员。编码的蛋白是替代补体途径的一个组成部分，因其在体液抑制感染性病原体方面的作用而最为著名。它是由肝脏和脂肪细胞合成的，后者是主要来源。被分泌的CFD的原形被MASP-3裂解，形成在体内循环的活性序列。它的催化三联体由Asp102、His57和Ser195组成。CFD的其他关键成分是一个Asp189-Arg218盐桥，它稳定了一个自我抑制环（氨基酸残基212至218）和His57侧链的非经典构象。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人补体因子D(CFD)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人补体因子D(CFD)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CFD, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.28
1.82
1.23
0.8
0.53
0.36
0.23
0.08
校正OD 值
2.19
1.73
1.14
0.71
0.27
0.27
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CFD , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.3-101.7
96.30
血浆(n=8)
92.0-106.4
103.50
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.4
105.70
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人CFD , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.2
91.40
89.0-96.0
94.40
90.8-110.0
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.5
94.40
87.5-108.0
98.40
105.7-115.8
108.70
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