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信号通路
英文名称: Human Angiotensinogen (AGT) ELISA Kit
别名: AGT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000ng/mL
灵敏度: 8.63ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、尿液、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
血管紧张素原是一种在肝脏中合成的α-2-球蛋白,是血管紧张素的前体,但也被指出具有许多与血管紧张素肽无关的其他作用。它是血清蛋白家族的成员,有另一个名字:血清蛋白A8,但它不像大多数血清蛋白那样被知道会抑制其他酶。血管紧张素原也被称为肾素底物。它在N端被肾素裂解,产生血管紧张素I,随后被修饰成血管紧张素II。该肽长485个氨基酸,当肾素作用于它时,N端10个氨基酸被裂解。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人血管紧张素原(AGT)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人血管紧张素原(AGT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的AGT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.15
1.7
1.2
0.77
0.43
0.23
0.14
0.04
校正OD 值
2.06
1.61
1.11
0.68
0.14
0.14
0.05
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人AGT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.3
96.50
血浆(n=8)
92.5-105.3
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.3
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人AGT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.3
91.60
88.9-96.1
93.30
90.0-110.8
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.8
94.40
87.2-108.3
98.90
105.9-115.1
109.30
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