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信号通路
英文名称: Human Angiogenin (ANG) ELISA Kit
别名: ANG
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 62.5-4,000pg/mL
灵敏度: 34.50pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
血管生长素(ANG)也被称为核糖核酸酶5,是一种123个氨基酸的小蛋白,由ANG基因编码。血管生长素是通过血管生成过程有效地刺激新血管,它水解细胞RNA,导致蛋白质合成水平的调节,并与DNA相互作用,导致rRNA表达的启动子样增加。另外,它通过血管生成和通过激活抑制细胞凋亡的基因表达与癌症和神经系统疾病有关。血管生长素也是一种与正常和肿瘤生长中的血管生成有关的关键蛋白,它与内皮细胞和平滑肌细胞相互作用,导致细胞迁移、入侵、增殖和形成管状结构。此外,它与平滑肌和内皮细胞的肌动蛋白结合,形成激活蛋白质分解级联的复合物,从而上调蛋白酶和浆蛋白的产生,降解基底膜的层粘连蛋白和纤维蛋白。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人血管生长素(ANG)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人血管生长素(ANG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ANG, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
4000
2000
1000
500
250
125
62.5
0
OD值
2.03
1.21
0.69
0.41
0.29
0.23
0.19
0.09
校正OD 值
1.94
1.12
0.6
0.32
0.14
0.14
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人ANG , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.2
95.90
血浆(n=8)
92.3-105.3
102.10
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.3
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人ANG , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.0
91.80
88.1-96.6
93.80
90.5-110.9
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.1
94.90
87.8-108.0
98.20
105.4-115.3
108.30
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