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信号通路
英文名称: Human Protein Disulfide Isomerase (PDI) ELISA Kit
别名: PDI
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.12ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白质二硫键异构酶(PDI)是真核生物的内质网(ER)和细菌的周质中的一种酶,在蛋白质折叠时催化蛋白质内半胱氨酸残基之间二硫键的形成和断裂。这使得蛋白质在完全折叠状态下能够迅速找到二硫键的正确排列,因此该酶起到催化蛋白质折叠的作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人蛋白质二硫键异构酶(PDI)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人蛋白质二硫键异构酶(PDI)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PDI, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.32
1.5
0.87
0.52
0.35
0.24
0.18
0.08
校正OD 值
2.23
1.41
0.78
0.43
0.15
0.15
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人PDI , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.5
96.90
血浆(n=8)
92.7-105.7
102.30
组织匀浆(n=8)
96.6-108.1
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人PDI , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
85.3-95.2
91.60
88.1-96.6
93.90
90.8-110.8
97.30
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.3
94.40
87.0-108.7
98.80
105.7-115.0
108.20
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