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信号通路
英文名称: Human Protein Phosphatase 2A(PP2A) ELISA Kit
别名: PP2A
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.1-5000pg/mL
灵敏度: 40pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白磷酸酶2(PP2),又称PP2A,是一种由PPP2CA基因编码的酶。PP2A异源蛋白磷酸酶是普遍表达的,占真核细胞中磷酸酶活性的一大部分。其丝氨酸/苏氨酸磷酸酶活性具有广泛的底物特异性和多样化的细胞功能。PP2A的目标包括致癌信号级联的蛋白质,如Raf、MEK和AKT,其中PP2A可能充当肿瘤抑制剂。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人蛋白磷酸酶2A(PP2A)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人蛋白磷酸酶2A(PP2A)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PP2A, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312.5
156.2
78.1
0
OD值
2.16
1.45
0.93
0.56
0.38
0.28
0.21
0.08
校正OD 值
2.07
1.36
0.84
0.47
0.19
0.19
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人PP2A , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.8-101.6
96.40
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆中加入高浓度人PP2A , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.2
91.70
1:04
范围
平均回收率
88.4-103.0
94.30
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