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信号通路
英文名称: Human Protein Kinase B Beta (PKBb) ELISA Kit
别名: PKBb;AKT2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78-5000pg/mL
灵敏度: 38pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白激酶Bβ(PKBb;AKT2)也被称为RAC-β丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是一种在由AKT2基因编码的酶。它作为胰岛素信号转导途径的一部分影响代谢物的储存。该基因是一个推定的肿瘤基因,编码的蛋白属于丝氨酸/苏氨酸激酶的AKT亚家族,含有SH2-like(Src同源2-like)结构域。编码的蛋白是一种普通的蛋白激酶,能够使几种已知的蛋白磷酸化。它作为胰岛素信号转导途径的一部分,在控制糖代谢、糖代谢和葡萄糖转运方面具有重要作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人蛋白激酶Bβ(PKBb;AKT2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人蛋白激酶Bβ(PKBb;AKT2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PKBb;AKT2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
5000
2500
1250
625
312
156
78
0
OD值
2.19
1.71
1.2
0.74
0.48
0.32
0.21
0.07
校正OD 值
2.1
1.62
1.11
0.65
0.23
0.23
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PKBb;AKT2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.6-102.4
96.20
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.3
105.90
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人PKBb;AKT2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.4
91.70
90.6-110.6
95.90
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.6
94.20
105.8-114.6
107.30
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