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信号通路
英文名称: Human Protein kinase A(PKA) ELISA Kit
别名: PKA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.074ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白激酶A(PKA)是一个酶家族，其活性取决于细胞中环状AMP（cAMP）的水平。它也被称为cAMP依赖的蛋白激酶（EC 2.7.11.11）。PKA在细胞中具有多种功能，包括调节糖原、糖和脂质的代谢。它是研究最广泛的蛋白激酶之一，部分原因是它的独特性；在构成激酶组的540个不同的蛋白激酶基因中，只有一个其他的蛋白激酶，即酪蛋白激酶2，以生理性四元复合物存在，即由四个亚单位组成。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人蛋白激酶A(PKA)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人蛋白激酶A(PKA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PKA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.56
1.77
1.22
0.71
0.46
0.31
0.23
0.07
校正OD 值
2.47
1.68
1.13
0.62
0.22
0.22
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PKA , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.6-101.7
96.20
血浆(n=8)
92.4-105.9
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.4-107.5
104.70
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人PKA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.8
91.50
88.2-96.9
93.50
90.2-110.2
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.6
94.30
87.9-108.1
98.60
105.5-115.6
109.60
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