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信号通路
英文名称: Human Protein kinase (PRKCA) ELISA Kit
别名: PRKCA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.158ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白激酶(PRKCA)是一种酶，是由PRKCA基因编码的。与该家族中的其他激酶相比，PKC-α的调节方式是独特的。一般来说，蛋白激酶家族是通过异生调节来调节的，即结合一个调节分子来影响酶的构象变化，从而改变酶的活性。然而，PKC-α的主要调节方式涉及其与细胞膜的相互作用，而不是与特定分子的直接相互作用。在较高的温度下，由于分子内运动的增加，磷脂以一种更流畅的状态存在。细胞膜的流动性越强，PKC-α的活性就越大。在较低的温度下，磷脂是以固体状态存在的，运动受到限制。当磷脂成为静止状态时，它们在膜内呈现出一个特定的方向。相对于膜而言，以不规则或有角度的方向凝固的磷脂可以降低PKC-α的活性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人蛋白激酶(PRKCA)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人蛋白激酶(PRKCA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PRKCA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.49
1.73
1.26
0.83
0.64
0.46
0.34
0.09
校正OD 值
2.4
1.64
1.17
0.74
0.37
0.37
0.25
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PRKCA , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.2-102.4
97.40
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.6
105.30
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人PRKCA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.7
91.20
90.5-110.4
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.9
94.90
105.4-116.7
108.70
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