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信号通路
英文名称: Human Protein Disulfide Isomerase-Associated 3 (PDIA3) ELISA Kit
别名: PDIA3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.25-80ng/mL
灵敏度: 0.7ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)又称葡萄糖调节蛋白和58-kD（GRP58），是一种异构酶。这种蛋白定位于内质网（ER），与凝集素伴侣calreticulin和calnexin（CNX）相互作用，调节新合成的糖蛋白的折叠。人们认为凝集素和该蛋白的复合物通过促进其糖蛋白底物中的二硫键的形成来介导蛋白质的折叠。此外，它通过与细胞分裂和细胞骨架蛋白（如β-肌动蛋白和波形蛋白）结合，形成一个复合物，控制TUBB3的折叠和微管与激振杆的正确连接，从而激活细胞在骨骼中的固定。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PDIA3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
80
40
20
10
5
2.5
1.25
0
OD值
2.04
1.61
1.23
0.84
0.53
0.35
0.23
0.08
校正OD 值
1.95
1.52
1.14
0.75
0.26
0.26
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人PDIA3 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.6-103.0
98.70
细胞裂解液(n=8)
92.8-105.4
102.80
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人PDIA3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.2
91.30
88.6-98.3
95.40
1:04
范围
平均回收率
88.6-103.9
94.30
87.0-108.1
98.20
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