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信号通路
英文名称: Human Tryptophan-2,3-dioxygenase (TDO) ELISA Kit
别名: TDO
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.076ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO),也被称为色氨酸酶(TO)或TDO2,是由TDO2基因编码的酶。在酶学中,它是一种血红素酶,其催化L-色氨酸氧化成N-甲酰基-L-犬尿氨酸,这是犬尿氨酸途径的第一个限速步骤。它作为色氨酸代谢整个生物学过程的一部分,在色氨酸通量的生理调节中起着重要作用。它催化色氨酸降解的第一步和限速步骤沿着犬尿氨酸途径, 从而调节全身色氨酸水平。这种酶属于氧化还原酶家族,特别是那些以O2作为氧化剂作用于单一供体并将两个氧原子掺入底物(加氧酶)中的酶。该家族包括TDO和密切相关的吲哚胺 2,3-双加氧酶 (IDO)。TDO和IDO每个单体都含有一种非共价结合的血红素;TDO通常是四聚体,而IDO是单体。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的TDO, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.16
1.45
0.93
0.56
0.38
0.28
0.21
0.08
校正OD 值
2.07
1.36
0.84
0.47
0.19
0.19
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人TDO , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
90.8-105.8
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.6
106.40
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人TDO , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.8-96.2
93.80
90.0-110.2
98.30
1:04
范围
平均回收率
87.6-108.7
98.40
105.6-115.9
108.80
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