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信号通路
英文名称: Human Autophagy Related Protein 5 (ATG5) ELISA Kit
别名: ATG5
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.37ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
自噬相关蛋白5(ATG5)是一种蛋白质,由位于6号染色体的ATG5基因编码。它是一种 E3 ubi 自噬细胞死亡。它是一个参与自噬泡中吞噬膜延伸的关键蛋白。它被ATG7激活，并与ATG12和ATG16L1形成一个复合物。这个复合物是LC3-I（微管相关蛋白1A/1B轻链3B）与PE（磷脂酰乙醇胺）结合形成LC3-II（LC3-磷脂酰乙醇胺结合物）的必要条件。它也可以作为一种针对线粒体的促凋亡分子。在低水平的DNA损伤下，ATG5可以转移到细胞核并与survivin相互作用。已知ATG5通过各种压力诱导的转录因子和蛋白激酶进行调节。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人自噬相关蛋白5(ATG5)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人自噬相关蛋白5(ATG5)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ATG5, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.36
1.56
1.04
0.65
0.46
0.34
0.29
0.1
校正OD 值
2.27
1.47
0.95
0.56
0.25
0.25
0.2
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人ATG5 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.1-101.5
96.60
血浆(n=8)
92.8-105.0
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.8-107.3
104.10
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人ATG5 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-96.1
92.80
88.9-96.5
93.20
90.0-110.1
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.5
94.20
87.3-108.6
98.20
105.2-115.6
108.70
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