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信号通路
英文名称: Human Ataxin (ATX) ELISA Kit
别名: ATX
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 93.7-6000pg/mL
灵敏度: 46.2pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
自分泌运动因子(Autotaxin)也被称为自趋化蛋白,外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶家族成员2(E-NPP2),是一种酶,由ENPP2基因编码。Autotaxin 是一种分泌酶,对产生脂质信号分子溶血磷脂酸 (LPA) 很重要。Autotaxin 具有溶血磷脂酶 D 活性,可将溶血磷脂酰胆碱转化为 LPA。它起磷酸二酯酶的作用。分泌 Autotaxin 并进一步加工以形成生物活性形式。已经确定了几种选择性剪接的转录本变体。自趋化因子能够裂解α和三磷酸核苷酸β位置之间的磷酸二酯键,与 ENPP 家族的大多数成员一样,充当产生焦磷酸盐的外核苷酸磷酸二酯酶。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人自分泌运动因子(ATX)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人自分泌运动因子(ATX)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ATX, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
6000
3000
1500
750
375
187.5
93.7
0
OD值
2.31
1.59
0.99
0.6
0.4
0.27
0.19
0.07
校正OD 值
2.22
1.5
0.9
0.51
0.18
0.18
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人ATX , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-102.5
96.20
血浆(n=8)
92.3-105.2
102.50
组织匀浆(n=8)
96.1-108.8
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人ATX , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.8
91.70
88.6-96.5
93.10
90.0-110.4
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.8
94.50
87.6-108.9
98.60
105.3-115.6
108.40
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