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信号通路
英文名称: Human Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase(AMPK)ELISA Kit
别名: AMPK
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.18ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)又称5'AMP激活的蛋白激酶或5'单磷酸腺苷激活的蛋白激酶，是一种酶。它在细胞能量平衡中起作用，主要是在细胞能量低时激活葡萄糖和脂肪酸的摄取和氧化。它属于一个高度保守的真核生物蛋白家族，其同源物是酵母中的SNF1和植物中的SnRK1。它由三个蛋白质（亚单位）组成，共同构成一个功能性酶。它在一些组织中表达，包括肝脏、大脑和骨骼肌。作为对结合AMP和ADP的反应，AMPK激活的净效应是刺激肝脏脂肪酸氧化、生酮作用，刺激骨骼肌脂肪酸氧化和葡萄糖摄取，抑制胆固醇合成、脂肪生成和甘油三酯合成，抑制脂肪细胞脂肪生成，抑制脂肪细胞脂肪分解，以及调节胰岛β细胞的胰岛素分泌。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的AMPK, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.97
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.88
0.22
0.22
0.1
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人AMPK , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
92.7-105.0
102.90
(n=8)
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆中加入高浓度人AMPK , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
88.2-96.5
93.10
1:04
范围
平均回收率
87.2-108.4
105.40
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