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信号通路
英文名称: Human Apurinic/apyrimidinic endonuclease 1(APE1) ELISA Kit
别名: APE1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.073ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)是一种酶，是由APEX1基因编码的。Apurinic/apyrimidinic（AP）位点（也称为 "消减位点"）通过自发水解、DNA损伤剂或去除特定异常碱基的DNA糖基化酶在DNA分子中经常发生。AP位点是突变前的病变，可以阻止正常的DNA复制。所有细胞，都进化出了识别和修复这种位点的系统。第二类AP内切酶在AP位点的5'处裂解磷酸二酯骨架，从而启动了一个被称为碱基切除修复（BER）的过程。APEX基因（备选名称为APE1、HAP1、APEN）编码了细胞中的主要AP内切酶。已发现该基因的剪接变体；所有剪接变体都编码相同的蛋白质。它已被证明与MUTYH、瓣膜结构特异性内切酶1和XRCC1相互作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的APE1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.49
1.62
0.96
0.53
0.33
0.24
0.2
0.08
校正OD 值
2.4
1.53
0.87
0.44
0.15
0.15
0.11
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人APE1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.3-101.8
96.90
血浆(n=8)
92.1-105.8
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.4-107.5
104.20
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人APE1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.0
91.50
88.3-96.6
93.60
90.7-110.4
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.5
94.80
87.4-108.6
98.80
105.0-115.3
108.20
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