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信号通路
英文名称: Human adipose triglyceride lipase (ATGL) ELISA Kit
别名: ATGL
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.14ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞培养上清
隐藏域元素占位
详细信息
简介
脂肪甘油三酯脂酶,也被称为含蛋白酶域的蛋白2和ATGL,由PNPLA2基因编码的酶。ATGL催化脂肪分解的第一个反应,其中三酰甘油被水解为二酰甘油。ATGL对三酰甘油具有非常高的底物特异性,它包含一个使用丝氨酸-天冬氨酸的催化二元组。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ATGL, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.36
1.36
0.8
0.48
0.34
0.26
0.22
0.09
校正OD 值
2.27
1.27
0.71
0.39
0.17
0.17
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人ATGL , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-101.3
96.60
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.1
105.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人ATGL , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
88.8-96.4
93.20
90.2-110.1
96.60
1:04
范围
平均回收率
87.7-108.4
98.90
105.5-115.4
108.60
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