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信号通路
英文名称: Human Adiponectin (ADPN) ELISA Kit
别名: ADPN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 78.12-5000pg/mL
灵敏度: 40.9pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
脂联素(又称GBP-28、apM1、AdipoQ和Acrp30)是一种蛋白质激素和脂肪因子,参与调节葡萄糖水平和脂肪酸分解。它由ADIPOQ基因编码,主要在脂肪组织中产生,但也在肌肉中,甚至在大脑中。脂联素是一种244个氨基酸长的多肽(蛋白质)。脂联素有四个不同的区域。首先是一个短的信号序列,针对激素在细胞外的分泌;接下来是一个短的区域,在不同的物种之间有所不同;第三个是一个65个氨基酸的区域,与胶原蛋白相似;最后一个是一个球状结构域。总的来说,这种蛋白质显示出与补体1Q因子(C1Q)的相似性。然而,当球状区域的三维结构被确定后,尽管蛋白质序列不相关,但观察到与TNF-α有惊人的相似性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人脂联素(ADPN)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人脂联素(ADPN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ADPN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人ADPN , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.9
96.40
血浆(n=8)
92.9-105.2
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.7
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人ADPN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.8
91.10
88.1-96.3
93.80
90.4-110.5
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.5-103.9
94.60
87.2-108.0
98.10
105.3-115.2
108.70
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