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信号通路
英文名称: Human Caspase 9 (CASP9) ELISA Kit
别名: CASP9
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.09ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胱天蛋白酶9(Caspase9)是一种酶，由CASP9基因编码。它是一种启动型caspase，对许多组织中发现的凋亡途径至关重要。它的同源物已在所有已知存在的哺乳动物中被发现，如Mus musculus和Pan troglodytes。Caspase-9属于caspase家族，是参与细胞凋亡和细胞因子信号的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶。凋亡信号导致细胞色素c从线粒体中释放并激活apaf-1（apoptosome），然后将caspase-9的原酶裂解为活性二聚体形式。该酶的调节是通过异生抑制剂的磷酸化发生的，抑制二聚体化并诱导构象变化。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人胱天蛋白酶9(CASP9)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人胱天蛋白酶9(CASP9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CASP9, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.61
2.12
1.36
0.79
0.44
0.27
0.21
0.09
校正OD 值
2.52
2.03
1.27
0.7
0.18
0.18
0.12
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CASP9 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
85.3-101.2
97.50
细胞培养上清(n=8)
96.6-109.8
105.60
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人CASP9 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-96.0
92.40
90.0-110.5
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.1
94.10
105.0-115.0
108.80
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