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信号通路
英文名称: Human Caspase 1 (CASP1) ELISA Kit
别名: CASP1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.8-500pg/mL
灵敏度: 3.5pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Caspase-1/白细胞介素-1转换酶(ICE)是一种进化保守的酶,它能将其他蛋白质,如炎症细胞因子白细胞介素1β和白细胞介素18的前体以及热病诱导剂Gasdermin D,蛋白分解为活性成熟肽。一旦通过形成炎症体复合物被激活,它就会通过裂解启动两种炎症细胞因子--白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18),以及通过裂解Gasdermin D启动火毒症(一种程序性细胞死亡途径)被Caspase-1激活的两种炎症细胞因子会从细胞中排出,进一步诱发邻近细胞的炎症反应。与CASP1相关的疾病包括牛痘和志贺氏病。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人胱天蛋白酶1(CASP1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人胱天蛋白酶1(CASP1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CASP1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.2
15.6
7.8
0
OD值
1.98
1.1
0.71
0.49
0.31
0.21
0.17
0.07
校正OD 值
1.89
1.01
0.62
0.4
0.12
0.12
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的人CASP1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
92.5-105.6
101.20
血浆(n=8)
96.5-108.7
105.10
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆中加入高浓度人CASP1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
88.4-96.2
93.20
90.3-110.2
96.50
1:04
范围
平均回收率
87.6-108.3
98.20
105.7-115.4
108.80
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