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信号通路
英文名称: Human Proinsulin (PI) ELISA Kit
别名: PI
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 12.5-800pg/mL
灵敏度: 4.79pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胰岛素原(PI)是胰岛素的前体激素,它是由由胰岛β细胞合成和分泌,主要在肾脏分解代谢。生理情况下,只有极少量的胰岛素原释放入血,在病理情况下,胰岛β细胞释放胰岛素原增多,血中胰岛素原水平升高。它是细胞在裂解成成熟胰岛素之前分泌的最后一个单链蛋白结构。它是由芝加哥大学的Donald F. Steiner教授在1967年发现的。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人胰岛素原(PI)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人胰岛素原(PI)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PI, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
800
400
200
100
50
25
12.5
0
OD值
2.32
1.93
1.31
0.85
0.51
0.39
0.28
0.1
校正OD 值
2.23
1.84
1.22
0.76
0.3
0.3
0.19
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PI , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.8
96.50
血浆(n=8)
92.9-105.1
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.0
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人PI , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.5
91.30
88.5-97.8
93.80
90.2-110.1
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.9
94.50
87.5-108.9
98.30
105.5-115.7
109.90
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