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信号通路
英文名称: Human Kelch Like ECH Associated Protein 1 (KEAP1) ELISA Kit
别名: KEAP1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.077ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胞质接头蛋白Keap1(KEAP1)一种由Keap1基因编码的蛋白质。它有四个不连续的蛋白结构域。N端广泛的复合、Tramtrack和Bric-à-Brac（BTB）结构域包含Cys151残基，这是压力感应中的重要半胱氨酸之一。干扰区（IVR）结构域包含两个关键的半胱氨酸残基，即Cys273和Cys288，这是第二组对压力感应重要的半胱氨酸。一个双甘氨酸重复（DGR）和C-末端区域（CTR）结构域合作形成一个β-螺旋桨结构，这就是Keap1与Nrf2相互作用的地方。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人胞质接头蛋白Keap1(KEAP1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人胞质接头蛋白Keap1(KEAP1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的KEAP1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.08
1.31
0.75
0.5
0.33
0.25
0.21
0.09
校正OD 值
1.99
1.22
0.66
0.41
0.16
0.16
0.12
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人KEAP1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.5-101.4
96.40
细胞培养上清(n=8)
96.2-107.3
104.10
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人KEAP1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-96.9
92.10
90.4-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.5
94.80
105.0-115.3
108.20
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