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信号通路
英文名称: Human Tumor Necrosis Factor Beta (TNF-b) ELISA Kit
别名: TNF-β
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200pg/mL
灵敏度: 1.27pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肿瘤坏死因子-β(TNF-β)也称淋巴毒素-α(LT-α),是一种蛋白质,在人类中由LTA基因编码。属于造血细胞系,LT-α表现出抗增殖活性,导致肿瘤细胞系的细胞破坏。作为一种细胞毒性蛋白,它在免疫调节中发挥着各种重要作用,取决于它分泌的形式。与TNF超家族的其他成员不同,LT-α仅以可溶性同源三聚体的形式存在,当在细胞表面发现时,它仅以与LTβ的异源三聚体的形式存在。它被翻译成一个25 kDa的糖基化多肽,有171个氨基酸残基。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人肿瘤坏死因子β(TNF-β)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人肿瘤坏死因子β(TNF-β)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的TNF-β, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.28
1.85
1.23
0.8
0.53
0.39
0.3
0.08
校正OD 值
2.19
1.76
1.14
0.71
0.3
0.3
0.21
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人TNF-β , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.2
96.40
血浆(n=8)
92.9-105.0
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.8
105.30
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人TNF-β , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.7
91.50
88.4-96.3
93.80
90.4-110.3
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.5
94.10
87.9-108.7
97.60
105.7-115.9
108.20
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