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信号通路
英文名称: Human Peptidylglycine Alpha Amidating Monooxygenase (PAM) ELISA Kit
别名: PAM
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.2-2000pg/mL
灵敏度: 15.2pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肽酰甘氨酸α酰胺化单加氧酶，也被称为PAM或PAL，是由PAM基因编码的酶。该酶参与许多信号肽和某些脂肪酸酰胺的生物合成。这种转化是通过将激素原转化为相应的酰胺来实现的。该酶是产生肽酰胺的唯一已知途径，其使肽更具亲水性。它具有两个具有催化活性的酶活性结构域 - 肽基甘氨酸α-羟基化单加氧酶（PHM）和肽基-α-羟基甘氨酸α-酰胺裂解酶（PAL）。这些催化结构域依次工作，将神经内分泌肽催化成活性α-酰胺产物。它催化的反应途径通过量子隧穿和底物预制进入。已经描述了编码不同亚型的多个交替剪接的转录本变体，但它们的一些全长序列尚不清楚。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人肽酰甘氨酸α酰胺化单加氧酶(PAM)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人肽酰甘氨酸α酰胺化单加氧酶(PAM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PAM, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.2
0
OD值
2.39
1.73
1.2
0.78
0.49
0.35
0.23
0.08
校正OD 值
2.3
1.64
1.11
0.69
0.26
0.26
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的人PAM , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.5-101.6
96.40
血浆(n=8)
92.7-105.9
103.20
组织匀浆(n=8)
98.2-108.4
105.30
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆组织匀浆中加入高浓度人PAM , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.9
91.40
88.1-96.3
93.60
90.3-110.7
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.0
94.40
87.4-108.5
100.60
106.0-115.8
108.30
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