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信号通路
英文名称: Human Peptidyl Arginine Deiminase Type II (PAD2) ELISA Kit
别名: PAD2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.8ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅱ,也被称为PAD2,是由PADI2基因编码的酶。该基因编码肽基精氨酸脱胺酶家族的一个成员,该酶通过在钙离子的存在下将精氨酸残基转化成瓜氨酸来催化蛋白质的翻译后脱氨。家庭成员具有不同的底物特异性和组织特异性表达模式。II型酶是最广泛表达的家庭成员。该酶的已知底物包括中枢神经系统中的髓鞘碱性蛋白和骨骼肌和巨噬细胞中的葡萄球菌素。这种酶被认为在神经退行性疾病(包括阿尔茨海默病和多发性硬化症)的发病和进展中起作用,并且它还与青光眼发病机制有关。该基因与其他四个副基因一起存在于一个簇中。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅱ(PAD2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人肽基精氨酸脱亚氨酶Ⅱ(PAD2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PAD2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
1.99
1.21
0.64
0.35
0.26
0.21
0.18
0.08
校正OD 值
1.9
1.12
0.55
0.26
0.12
0.12
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PAD2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
95.4-105.5
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.3
104.60
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人PAD2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
88.0-96.8
93.90
90.1-110.6
97.30
1:04
范围
平均回收率
89.0-108.8
98.70
105.3-115.1
108.50
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