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信号通路
英文名称: Human Creatine Kinase, Muscle (CKM) ELISA Kit
别名: CKM
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.63ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肌肉肌酸激酶(CKM)由MCK基因编码。它是一种参与细胞能量稳态的细胞质酶。它可逆地催化 ATP 和肌酸之间以及磷酸肌酸和 ADP 之间“富含能量”的磷酸盐的转移。其功能实体是横纹(肌节)骨骼肌和心肌中的 MM-CK 同源二聚体。在心脏中,除了 MM-CK 同源二聚体外,还表达了由一个肌肉 (M-CK) 和一个脑型 (B-CK) 亚基组成的异源二聚体 MB-CK。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人肌肉肌酸激酶(CKM)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人肌肉肌酸激酶(CKM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CKM, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.56
1.77
1.22
0.71
0.46
0.31
0.23
0.07
校正OD 值
2.47
1.68
1.13
0.62
0.22
0.22
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CKM , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.4
96.50
血浆(n=8)
92.2-105.0
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.0-107.6
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人CKM , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.2
91.10
88.5-96.0
93.40
90.0-110.7
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.8
94.30
87.5-108.4
98.70
104.2-115.0
108.40
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