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信号通路
英文名称: Human Phosphofructokinase, Muscle (PFKM) ELISA Kit
别名: PFKM
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.11ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肌肉磷酸果糖激酶(PFKM),也被称为肌肉型6-磷酸果糖激酶,是由PFKM基因编码的酶。存在三种磷酸果糖激酶同工酶:肌肉,肝脏和血小板。这些同工酶作为哺乳动物四聚体磷酸果糖激酶的亚基起作用,其催化果糖-6-磷酸的磷酸化为果糖-1,6-二磷酸。四聚体组成因组织类型而异。该基因编码肌肉型同工酶。该基因的突变与糖原贮积病VII型有关,也称为塔鲁伊病。已经描述了交替的拼接转录本变体。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PFKM, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.31
0
OD值
2.12
1.58
1.14
0.77
0.53
0.35
0.24
0.08
校正OD 值
2.03
1.49
1.05
0.68
0.26
0.26
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的人PFKM , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-103.9
96.90
细胞裂解液(n=8)
92.4-105.2
101.40
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度人PFKM , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.6-94.3
91.10
88.7-96.8
93.10
1:04
范围
平均回收率
88.0-103.0
94.40
87.7-108.8
100.40
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