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信号通路
英文名称: Human Poly [ADP-ribose] polymerase 1 (PARP1) ELISA Kit
别名: PARP1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.35ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
聚(ADP核糖)聚合酶1(PARP11),也被称为NAD+ ADP-核糖基转移酶1(ADPRT1),是由PARP11基因编码的酶。它是PARP家族酶中最丰富的,占该家族使用的NAD+的90%。它主要存在于细胞核中,但也有报道称这种蛋白质的细胞质部分。它通过使用NAD +合成聚ADP核糖(PAR)并将PAR部分转移到蛋白质(ADP-核糖基化)中。它与BRCA一起作用于双链。它与几个DNA修复过程的调节有关,包括核苷酸切除修复,非同源末端连接,微同源介导的末端连接,同源重组修复和DNA不匹配修复的途径。它在修复单链DNA(ssDNA)断裂方面起作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人聚(ADP核糖)聚合酶1(PARP1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人聚(ADP核糖)聚合酶1(PARP1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PARP1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.51
1.76
1.14
0.72
0.46
0.3
0.22
0.09
校正OD 值
2.42
1.67
1.05
0.63
0.21
0.21
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PARP1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.6-101.8
96.90
血浆(n=8)
92.3-103.8
100.80
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.3
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人PARP1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-96.2
92.50
88.6-96.7
93.90
90.2-110.6
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.3
94.50
87.0-108.8
98.40
105.2-115.9
108.80
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