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信号通路
英文名称: Human Cytokeratin 18 M65(CK18-M65) ELISA Kit
别名: CK18-M65
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000U/L
灵敏度: 7.6U/L
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)是细胞骨架的中间丝蛋白家族中最大,最复杂的亚类,CK18 属于其中一员,主要包括M30 和M65 两个片段.血浆中的M65 片段可反映细胞坏死后释放入血的 CK18 的总量,而 M30 片段则成为临床上细胞凋亡的标志物之一.近年来随着研究的不断扩展深入,CK18 不仅在多个系统的肿瘤的诊断以及转移,复发,预后均有意义,而且在肝脏疾病以及重症感染等领域的作用越发被认识以及重视。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人细胞角蛋白18-M65(CK18-M65)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人细胞角蛋白18-M65(CK18-M65)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CK18-M65, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度U/L
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CK18-M65 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.3
96.50
血浆(n=8)
92.1-105.6
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.0
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人CK18-M65 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.0
91.70
88.2-96.3
93.40
90.0-110.1
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.6
94.50
87.2-108.9
98.20
105.6-115.8
108.30
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