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信号通路
英文名称: Human Cytokeratin 18-M30(CK18-M30) ELISA Kit
别名: CK18-M30
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.8-500U/L
灵敏度: 3.7U/L
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)是细胞骨架的中间丝蛋白家族中最大,最复杂的亚类,它是细胞骨架的构成部分,主要存在于所有上皮细胞和部分非上皮细胞,用于维持细胞的形状和抵抗外界的应力,就像细胞内部的支架,起到支撑作用。角蛋白主要分为I型(酸性)和II型(碱性),每一种类型都有很多种。CK18属于其中一员,主要包括M30和M65两个片段。血浆中的M 65片段可反映细胞坏死后释放入血的CK18的总量,而M30片段则成为临床上细胞凋亡的标志物之一。CK18不仅在多个系统的肿瘤的诊断以及转移,复发,预后均有意义,而且在肝脏疾病以及重症感染等领域的作用越发被认识以及重视。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人细胞角蛋白18-M30(CK18-M30)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人细胞角蛋白18-M30(CK18-M30)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的CK18-M30, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度U/L
500
250
125
62.5
31.2
15.6
7.8
0
OD值
2.12
1.58
1.14
0.77
0.53
0.35
0.24
0.08
校正OD 值
2.03
1.49
1.05
0.68
0.26
0.26
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人CK18-M30 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.3
96.60
血浆(n=8)
92.3-105.9
102.60
细胞培养上清(n=8)
95.2-108.9
104.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人CK18-M30 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-96.6
92.60
88.6-96.0
93.20
90.9-110.5
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.6
94.50
87.8-108.3
98.50
105.3-115.7
108.90
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