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信号通路
英文名称: Human Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI) ELISA Kit
别名: TFPI
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.07ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血浆、尿液、组织匀浆、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
组织因子途径抑制物(TFPI)是一种单链多肽,可以可逆地抑制因子Xa。当Xa被抑制时,Xa-TFPI复合物随后也能抑制FVIIa-组织因子复合物。TFPI的基因位于染色体2q31-q32.1,有九个外显子,横跨70kb。除了TFPI活性外,其产物还具有促进视网膜色素上皮细胞生长的特性。另外它的相对分子质量为34,000至40,000,取决于C端区域的蛋白分解程度。TFPI由一个高负电荷的氨基端、三个串联的Kunitz结构域和一个高正电荷的羧基端组成,凭借其Kunitz结构域,TFPI与人的α-胰蛋白酶抑制剂和牛的碱性胰蛋白酶抑制剂表现出显著的同源性。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人组织因子途径抑制物(TFPI)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人组织因子途径抑制物(TFPI)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的TFPI, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.15
1.69
1.14
0.85
0.52
0.34
0.25
0.12
校正OD 值
2.06
1.6
1.05
0.76
0.25
0.25
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人TFPI , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血浆(n=8)
92.4-105.9
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.9
105.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康人血浆细胞培养上清中加入高浓度人TFPI , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
88.5-96.1
93.10
90.6-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
87.3-108.0
98.80
105.9-115.6
108.10
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