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信号通路
英文名称: Human Fibronectin (FN) ELISA Kit
别名: FN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.22ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
纤连蛋白(FN)是细胞外基质的一种高分子量（约500-600 kDa）糖蛋白，与称为整合素的跨膜受体蛋白结合。纤连蛋白还与其他细胞外基质蛋白结合，如胶原蛋白、纤维蛋白和硫酸肝素蛋白多糖。纤连蛋白以蛋白二聚体的形式存在，由两条几乎相同的多肽链组成，通过一对C端二硫键连接。每个纤连蛋白亚单位的氨基酸分子量为~230-~275 kDa，包含三种类型的模块：I型、II型和III型。所有这三种模块都是由两个反平行的β-片组成，形成一个Beta-三明治；然而，I型和II型是由链内二硫键稳定的，而III型模块不包含任何二硫键。III型模块中没有二硫键，这使得它们在受力时可以部分展开。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人纤连蛋白(FN)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人纤连蛋白(FN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的FN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.25
1.64
1.08
0.71
0.46
0.33
0.25
0.08
校正OD 值
2.16
1.55
0.99
0.62
0.24
0.24
0.16
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人FN , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.3-101.5
96.40
血浆(n=8)
92.7-105.3
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.9
105.40
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人FN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.4
91.80
88.2-96.1
93.60
90.1-110.3
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.3
94.80
87.5-108.5
98.40
105.0-115.3
108.90
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