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信号通路
英文名称: Human Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI-1) ELISA Kit
别名: PAI-1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 62.5-4000pg/mL
灵敏度: 24.93pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
PAI-1也被称为内皮凝血酶原激活剂抑制剂或血清蛋白E1,它是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin),主要功能是抑制尿激酶浆蛋白原激活剂(uPA),是一种负责裂解浆蛋白原以形成浆蛋白的酶。浆蛋白本身或与基质金属蛋白酶一起介导细胞外基质的降解。在这种情况下,PAI-1通过活性位点结合抑制uPA,阻止浆蛋白的形成。额外的抑制是通过PAI-1与uPA/uPA受体复合物结合,导致后者降解。 因此,可以说PAI抑制了丝氨酸蛋白酶tPA和uPA/urokinase,因此是纤维蛋白溶解的抑制剂,纤维蛋白溶解是降解血凝块的生理过程。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的PAI-1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
4000
2000
1000
500
250
125
62.5
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人PAI-1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.9
96.10
血浆(n=8)
92.3-105.5
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.0
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人PAI-1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.6
91.10
88.7-96.4
93.40
90.4-110.9
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.6
94.30
87.8-108.6
98.30
105.5-115.2
108.30
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