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信号通路
英文名称: Human Glucocorticoid Receptor Alpha (GR-a) ELISA Kit
别名: GR-α
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.12ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
糖皮质激素受体α(GR-α)是糖皮质激素受体的一类亚型，另一类是GRβ。两者均为糖皮质激素受体基因同一转录产物通过不同的剪切方式剪切的结果。后者能与DNA结合，但不与类固醇结合，因此可能会通过干扰GRα与DNA结合，而成为类固醇的抑制物。GRα和GRβ的前727个氨基酸完全相同，从第728个氨基酸开始GRα有50个氨基酸序列，而GRβ只有15个氨基酸序列。在mRNA水平上，两者都包含第1到第8外显子，不同之处为GRα包含9α外显子，而GRβ包含9β外显子。GRα几乎在所有组织和细胞中均有表达，在绝大多数细胞中其含量也远远超过GRβ，且糖皮质激素主要是通过结合GRα发挥其生物学效应。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人糖皮质激素受体α(GR-α)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人糖皮质激素受体α(GR-α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GR-α, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.44
1.87
1.29
0.83
0.58
0.38
0.27
0.08
校正OD 值
2.35
1.78
1.2
0.74
0.29
0.29
0.18
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人GR-α , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
92.4-104.6
101.50
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.5
105.50
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度人GR-α , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.0
91.60
89.1-110.6
96.40
1:04
范围
平均回收率
88.7-103.9
93.50
105.4-115.8
108.20
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