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信号通路
英文名称: Human Glycogen Synthase Kinase 3 Beta (GSK3b) ELISA Kit
别名: GSK3β
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.156ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
糖原合成酶激酶3β(GSK3β)是一种由GSK3β基因编码的酶,是一种在进化上非常保守的丝氨酸/苏氨酸激酶,普遍存在于哺乳动物真核细胞中,除去最早发现的调控糖原合成酶(GS ) 的活性外,它还能作用于众多信号蛋白结构蛋白和转录因子,调节细胞的分化、增殖、存活和凋亡。在癌症神经退行性疾病神经精神类疾病等多种重大疾病的研究中,选择其作为治疗靶点。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人糖原合成酶激酶3β(GSK3β)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人糖原合成酶激酶3β(GSK3β)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GSK3β, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.36
1.36
0.8
0.48
0.34
0.28
0.23
0.09
校正OD 值
2.27
1.27
0.71
0.39
0.19
0.19
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人GSK3β , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.6-101.0
96.90
细胞裂解液(n=8)
92.0-107.1
104.30
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.7
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度人GSK3β , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.3
91.10
88.0-96.5
93.20
90.3-110.7
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.4
94.60
87.8-108.8
98.20
105.6-115.9
108.50
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