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信号通路
英文名称: Human Mucin 1 (MUC1) ELISA Kit
别名: MUC1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.8-500pg/mL
灵敏度: 3.98pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
粘蛋白1(MUC1),又称多态上皮粘蛋白(PEM)或上皮膜抗原或EMA,由MUC1基因编码的一种粘蛋白。粘蛋白在肺、胃、肠、眼睛和其他一些器官的上皮细胞顶端表面排列。它通过病原体与胞外结构域的寡糖结合,防止病原体到达细胞表面,从而保护身体免受感染。MUC1是粘液蛋白家族的一员,编码为一种膜结合的糖基化磷蛋白。它的核心蛋白质量为120-225 kDa,随着糖基化增加到250-500 kDa。它延伸到细胞表面以外200-500纳米处。该蛋白通过一个跨膜结构域固定在许多上皮细胞的顶端表面。跨膜结构域之外是一个SEA结构域,包含一个裂解位点,用于释放大的胞外结构域。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人粘蛋白1(MUC1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人粘蛋白1(MUC1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的MUC1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.2
15.6
7.8
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人MUC1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.6-101.7
96.80
细胞裂解液(n=8)
92.4-105.7
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.1
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康人组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度人MUC1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.2
91.10
88.6-96.6
93.90
90.6-110.5
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.5
94.10
87.2-108.3
98.10
105.0-115.2
108.60
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