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信号通路
英文名称: Human Ubiquitin Cross Reactive Protein (UCRP) ELISA Kit
别名: ISG15
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.36ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
干扰素刺激基因15（ISG15）是一种17kDA的分泌蛋白，由ISG15基因编码。它由I型干扰素（IFN）诱导，具有许多功能，既是细胞外细胞因子，又是细胞内蛋白修饰剂。确切的功能是多种多样的，在不同的物种中有所不同，但包括增强淋巴细胞中干扰素γ（IFN-II）的产生，对新合成的蛋白质进行类似泛素的结合，以及对IFN-I反应进行负向调节。未成熟的多肽在其羧基末端被裂解，产生一个15 kDa的成熟产物，其末端有一个LRLRGG图案，就像在泛素中发现的那样。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有人类泛素蛋白(ISG15)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人类泛素蛋白(ISG15)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的ISG15, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.56
1.45
0.8
0.48
0.33
0.23
0.2
0.08
校正OD 值
2.47
1.36
0.71
0.39
0.14
0.14
0.11
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人ISG15 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.5-101.9
96.80
血浆(n=8)
92.2-105.7
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.0
105.70
线性稀释：分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人ISG15 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-96.9
91.60
88.9-96.6
93.60
90.7-110.7
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.9
94.20
87.3-108.7
98.10
105.9-115.0
108.30
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