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信号通路
英文名称: Human HIV-1 P24 ELISA Kit
别名: HIV-1 P24
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 6.8pg/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
P24是一种独特的HIV病毒蛋白抗原,这是一种结构性蛋白,构成了HIV病毒核心或 "帽状体 "的大部分。在感染和血清转换之间的短时间内,新感染者的血清中存在高水平的p24,这使得p24抗原检测在诊断HIV原发感染时非常有用。在血清转换期间会产生p24抗体,使p24抗原在大多数情况下在血清转换后无法检测到。因此,p24抗原检测对于诊断最早阶段的HIV感染并不可靠。然而,与单纯的抗体检测相比,用抗体/抗原联合检测可以可靠地早期诊断HIV感染,第四代抗体/抗原检测现在是英国和其他一些国家的标准筛查方法。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人类免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV-1 P24)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人类免疫缺陷病毒1型p24抗原(HIV-1 P24)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的HIV-1 P24, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人HIV-1 P24 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.2
96.80
血浆(n=8)
92.2-105.9
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.6
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人HIV-1 P24 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.3
91.80
88.3-96.8
93.10
90.6-110.1
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.5
94.70
87.6-108.7
98.70
105.7-115.9
108.80
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