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信号通路
英文名称: Human Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP) ELISA Kit
别名: GFAP
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.14ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)是由GFAP基因编码的蛋白质。它是一种III型中间丝(IF)蛋白,由中枢神经系统(CNS)的许多细胞类型表达,包括星形胶质细胞和发育期的上皮细胞。GFAP还被发现在大鼠肾脏的肾小球和肾小管周围的成纤维细胞、仓鼠和人类睾丸的Leydig细胞、人类角质细胞、人类骨细胞和软骨细胞以及大鼠胰腺和肝脏的星状细胞中都有表达。GFAP与其他三个非上皮的III型IF家族成员--波形蛋白、脱敏蛋白和外周蛋白密切相关,它们都参与细胞骨架的结构和功能。该蛋白由Lawrence F. Eng于1969年命名,并首次对其进行分离和定性
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中人的GFAP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.59
1.47
0.81
0.48
0.33
0.23
0.21
0.08
校正OD 值
2.5
1.38
0.72
0.39
0.14
0.14
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康人血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的人GFAP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.9
96.90
血浆(n=8)
92.6-105.5
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.3
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康人血清血浆细胞培养上清中加入高浓度人GFAP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.4
91.20
88.3-96.9
93.10
90.5-110.0
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.8
94.60
88.4-108.9
98.10
105.4-115.0
108.30
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